วิธีกล้องจุลทรรศน์จุลชีววิทยา

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. วิธีการวิจัยกล้องจุลทรรศน์วิธีการสำรวจความหลากหลายของวัตถุที่มีการใช้อุปกรณ์พิเศษ จะช่วยให้เราที่จะต้องพิจารณาโครงสร้างของสารและสิ่งมีชีวิตที่สำคัญในการที่เกินขอบเขตของมติของสายตามนุษย์ บทความนี้จะช่วยให้การวิเคราะห์สั้น ๆ ของวิธีกล้องจุลทรรศน์

ภาพรวม

используют в своей практике разные специалисты. วิธีการที่ทันสมัยของการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์โดยใช้ผู้เชี่ยวชาญที่แตกต่างกันในการปฏิบัติของพวกเขา ในหมู่พวกเขาเป็นนักไวรัสวิทยาเซลล์วิทยาวิทยาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและอื่น ๆ วิธีการหลักของการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เป็นที่รู้จักกันเป็นเวลานาน ครั้งแรกเป็นวิธีที่แสงในการมองวัตถุ ในปีที่ผ่านมานำมาสู่การปฏิบัติอย่างแข็งขันและเทคโนโลยีอื่น ๆ . ดังนั้นความนิยมของมาเฟสตรงกันข้ามเรืองแสงรบกวน, โพลาไรซ์อินฟราเรดอัลตราไวโอเลตวิธีสามมิติของการวิจัย ทั้งหมดของพวกเขาจะขึ้นอยู่กับความหลากหลายของคุณสมบัติของแสง . นอกจากนี้วิธีการใช้กันอย่างแพร่หลายกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน วิธีการเหล่านี้ให้วัตถุที่แสดงผลโดยใช้ทิศทางการไหลของอนุภาคที่มีประจุ มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าวิธีการศึกษาเหล่านี้จะใช้ไม่เพียง แต่ในทางชีววิทยาและการแพทย์ в промышленности. วิธีที่นิยมมากของการศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์โลหะและโลหะผสมในอุตสาหกรรม นี้จะช่วยให้การศึกษาเพื่อประเมินพฤติกรรมของสารในการผลิตเทคโนโลยีเพื่อลดความน่าจะเป็นของการแตกหักและความแข็งแรงเพิ่มขึ้น

วิธีแสง: ลักษณะ

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. วิธีการดังกล่าวด้วยกล้องจุลทรรศน์สำหรับการศึกษาจุลินทรีย์และสิ่งอำนวยความสะดวกอื่น ๆ ที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับ ความละเอียดของ อุปกรณ์ เป็นปัจจัยสำคัญในเรื่องนี้เป็นทิศทางของลักษณะลำแสงของวัตถุเอง หลังโดยเฉพาะอย่างยิ่งสามารถมีความโปร่งใสหรือทึบแสง สอดคล้องกับคุณสมบัติของวัตถุที่มีการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติทางกายภาพของฟลักซ์แสง - ความสว่างและสีเนื่องจากความกว้างและความยาวคลื่นเครื่องบินเฟสและทิศทางของคลื่น . เกี่ยวกับการใช้ลักษณะเหล่านี้และสร้างวิธีการที่แตกต่างกันด้วยกล้องจุลทรรศน์

ความจำเพาะ

เพื่อศึกษารูปแบบของวัตถุที่แสงมักจะย้อมสี นี้จะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะระบุและอธิบายเหล่านี้หรือคุณสมบัติอื่น ๆ มันเป็นสิ่งจำเป็นที่เนื้อเยื่อได้รับการแก้ไขตั้งแต่สีเปิดเผยโครงสร้างบางอย่างโดยเฉพาะในเซลล์ฆ่า ในการดำรงชีวิตเซลล์แยกสีย้อมผ้าในรูปแบบของ vacuoles ในพลาสซึมที่ เธอไม่ได้วาดมากกว่าโครงสร้าง แต่ด้วยความที่วัตถุที่อยู่อาศัยและสามารถตรวจสอบการใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง เพื่อจุดประสงค์นี้วิธีที่สำคัญของการเรียนรู้ ในกรณีดังกล่าวคอนเดนเซอร์ Darkfield มันฝังอยู่ในกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

การศึกษาวัตถุทาสี

มันจะดำเนินการโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เฟสตรงกันข้าม วิธีการนี้จะขึ้นอยู่กับการเลี้ยวเบนของแสงให้เป็นไปตามที่มีลักษณะของวัตถุ ในช่วงการเปลี่ยนแปลงการเปิดรับการทำเครื่องหมายในเฟสและความยาวคลื่น ในเลนส์กล้องจุลทรรศน์เป็นแผ่นโปร่งแสงปัจจุบัน อาศัยอยู่หรือคงที่ แต่ไม่ได้วาดวัตถุเนื่องจากความโปร่งใสของมันเกือบจะไม่เปลี่ยนสีและความกว้างของคานผ่านพวกเขายั่วเพียงการเคลื่อนตัวของคลื่นเฟสที่ แต่ในกรณีนี้หลังจากผ่านวัตถุที่ไหลแสงหักเหโดยแผ่น เป็นผลให้ระหว่างคานหายไปผ่านวัตถุและเข้ามาในพื้นหลังสีอ่อนที่แตกต่างยาวของคลื่นที่เกิดขึ้น ที่ค่าบางอย่างของผลกระทบที่เกิดขึ้นภาพ - วัตถุสีเข้มจะเห็นได้อย่างชัดเจนบนพื้นหลังแสงหรือในทางกลับกัน (สอดคล้องกับลักษณะของแผ่นเฟสที่) ที่จะได้รับความแตกต่างนี้ควรมีอย่างน้อย 1/4 ความยาวคลื่น

วิธี Anoptralny

เขาเป็นชนิดของวิธีการเฟสความคมชัด วิธี Anoptralny เกี่ยวข้องกับการใช้เลนส์ที่มีจานพิเศษซึ่งเปลี่ยนเฉพาะสีและความสว่างของแสงโดยรอบ นี้จะช่วยขยายความเป็นไปของการศึกษาวัตถุที่อยู่อาศัยไม่มีรอยเปื้อน , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. สมัครเฟสตรงกันข้ามการวิจัยวิธีกล้องจุลทรรศน์จุลชีววิทยาปรสิตวิทยาในการศึกษาของพืชและสัตว์เซลล์โปรโตซัว ในวิธีการทางโลหิตวิทยาที่ใช้ในการคำนวณและตรวจสอบความแตกต่างของเซลล์เลือดและไขกระดูก

เทคนิคการรบกวน

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. วิธีการเหล่านี้การวิจัยกล้องจุลทรรศน์โดยทั่วไปในการแก้ปัญหาเช่นเดียวกับความคมชัดเฟส อย่างไรก็ตามในกรณีหลังนี้ผู้เชี่ยวชาญสามารถสังเกตรูปทรงของวัตถุ методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. รบกวนวิธีการวิจัยกล้องจุลทรรศน์ช่วยให้เราสามารถศึกษาเป็นส่วนหนึ่งของพวกเขาดำเนินการองค์ประกอบประเมินเชิงปริมาณ นี้เป็นไปได้เนื่องจากการแยกของลำแสง หนึ่งสตรีมผ่านวัตถุอนุภาคและอื่น ๆ - โดย ในช่องมองภาพของกล้องจุลทรรศน์ที่พวกเขาตอบสนองและรบกวน ความแตกต่างที่เกิดขั้นตอนจะถูกกำหนดโดยน้ำหนักของโครงสร้างโทรศัพท์มือถือที่แตกต่างกัน เมื่อวัดตามลำดับคือกับที่กำหนดไว้ ดัชนีหักเห สามารถตั้งค่ากระดาษทิชชูหนาไม่เจาะจงและวัตถุที่อยู่อาศัยปริมาณโปรตีนนั้นความเข้มข้นของของแข็งและน้ำและอื่น ๆ . สอดคล้องกับผู้เชี่ยวชาญด้านข้อมูลที่ได้รับสามารถที่จะอ้อมประเมินการซึมผ่านเยื่อเอนไซม์, เผาผลาญของเซลล์

โพลาไรซ์

มันจะดำเนินการโดยวิธีการของปริซึมโรลหรือโพลารอยด์เยิ้ม พวกเขาจะอยู่ระหว่างชิ้นงานและแหล่งกำเนิดแสง позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. วิธีการใช้กล้องจุลทรรศน์ polarizing ของการวิจัยทางจุลชีววิทยาช่วยให้เราเพื่อศึกษาวัตถุที่มีคุณสมบัติ inhomogeneous ในโครงสร้าง isotropic ความเร็วของการแพร่กระจายของแสงเป็นอิสระจากเครื่องบินที่เลือก ในระบบ anisotropic อัตราแตกต่างกันไปตามแสงที่มุ่งเน้นตามแนวขวางหรือแกนตามยาวของวัตถุ ถ้าค่าดัชนีหักเหไปตามโครงสร้างจะสูงกว่าตามขวางสร้างหักเหคู่บวก นี้เป็นปกติของวัตถุทางชีวภาพจำนวนมากที่ได้พบว่ามีการวางแนวทางโมเลกุลที่เข้มงวด พวกเขาทั้งหมดจะ anisotropic ในหมวดหมู่นี้โดยเฉพาะอย่างยิ่ง myofibrils ที่ neurofibrils, ตาในเยื่อบุผิว ciliated เส้นใยคอลลาเจนและอื่น ๆ

ค่าโพลาไรซ์

การเปรียบเทียบลักษณะของการฉายรังสีและ anisotropy ดัชนีหักเหของวัตถุที่จะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะประเมินโครงสร้างโมเลกุลขององค์กร วิธีการโพลาไรซ์ที่ทำหน้าที่เป็นหนึ่งในวิธีการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อที่ใช้ในการติดเชื้อ HPV และอื่น ๆ . ไม่วัตถุที่วาดก็สามารถได้รับการศึกษาในที่มีแสง วิธีการโพลาไรซ์ทำให้มันเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบไม่มีรอยเปื้อนและไม่เจาะจง - พื้นเมือง - การเตรียมการในส่วนของเนื้อเยื่อ

เทคนิคการเรืองแสง

พวกเขาจะขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของวัตถุบางอย่างให้เรืองแสงในส่วนสีม่วงสีฟ้าของสเปกตรัมหรือรังสียูวี สารหลายอย่างเช่นโปรตีนวิตามินบางโคเอนไซม์ยาเสพติด endowed กับหลัก (en) เรืองแสง วัตถุอื่น ๆ เริ่มที่จะเรืองแสงโดยการเพิ่มสารเรืองแสง - การย้อมสีพิเศษ สารเติมแต่งเหล่านี้มีการคัดเลือกกระจายหรือการกระจายเป็นโครงสร้างโทรศัพท์มือถือที่แยกต่างหากหรือสารประกอบทางเคมี สถานที่แห่งนี้เป็นพื้นฐานในการใช้ของ กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง กับฮีสโตเคมีและ การศึกษาเซลล์วิทยา

พื้นที่ของการใช้งาน

ใช้ผู้เชี่ยวชาญด้านภูมิคุ้มกันเรืองแสงตรวจหาแอนติเจนของไวรัสและความเข้มข้นของพวกเขาปรับเปลี่ยนจะมีการระบุไวรัสร่างกายต่อต้านและแอนติเจนฮอร์โมนผลิตภัณฑ์เผาผลาญต่างๆและอื่น ๆ ในเรื่องนี้การวินิจฉัยของโรคเริมคางทูมไวรัสตับอักเสบบี, โรคไข้หวัดใหญ่และการติดเชื้ออื่น ๆ โดยใช้วิธีการเรืองแสงของการวิจัยวัสดุ иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. วิธีอิมมูโนเรืองแสงกล้องจุลทรรศน์ตรวจพบมะเร็งเนื้องอกกำหนดพื้นที่ขาดเลือดของหัวใจในระยะแรกของหัวใจวายและอื่น ๆ

การใช้รังสีอัลตราไวโอเลต

มันขึ้นอยู่กับความสามารถของจำนวนของสารในเซลล์หรือจุลินทรีย์ที่มีชีวิตได้รับการแก้ไข แต่ไม่ทาสีโปร่งใสภายใต้แสงที่มองเห็นผ้าดูดซับรังสียูวีของความยาวคลื่นที่เฉพาะเจาะจง นี่คือความจริงโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับสารประกอบโมเลกุลสูง เหล่านี้รวมถึงโปรตีนกรดอะโรมาติก (methylalanine, โพรไบโอซายน์ ฯลฯ ), กรดนิวคลีอิกและฐาน purine piramidinovye และอื่น ๆ กล้องจุลทรรศน์ UV ช่วยให้การระบุตำแหน่งและจำนวนของสารเหล่านี้ ในการศึกษาของสิ่งมีชีวิตมืออาชีพที่สามารถสังเกตเห็นการเปลี่ยนแปลงในกระบวนการเผาผลาญอาหารของพวกเขา

นอกจากนี้

กล้องจุลทรรศน์อินฟราเรดถูกนำมาใช้ในการศึกษามีความทึบแสงและรังสีอัลตราไวโอเลตรังสีผ่านการดูดซึมของวัตถุที่ไหลโครงสร้างที่มีความยาวคลื่น 750-1200 นาโนเมตร เมื่อต้องการใช้วิธีการนี้มีความจำเป็นต้องไปก่อนเปิดเผยยาเสพติดกับการรักษาทางเคมี โดยปกติวิธี IR ที่ใช้ในมานุษยวิทยาสัตววิทยาและวิทยาศาสตร์อื่น ๆ ในอุตสาหกรรม ในฐานะที่เป็นยาวิธีนี้ส่วนใหญ่จะใช้ในจักษุวิทยาและ Neuromorphology วัตถุศึกษามิติโดยใช้กล้องจุลทรรศน์สามมิติ ช่วยให้การออกแบบฮาร์ดแวร์สำหรับการตรวจสอบตาซ้ายและขวาที่มุมที่แตกต่าง วัตถุทึบแสงจะถูกตรวจสอบที่กำลังขยายค่อนข้างต่ำ (120 ครั้งที่มากที่สุด) วิธีการสามมิติที่ใช้ในการผ่าตัด, Pathomorphology ในการแพทย์นิติเวช

กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน

มันถูกใช้ในการศึกษาโครงสร้างของเซลล์และเนื้อเยื่อในระดับโมเลกุลและ subcellular กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ให้เราสามารถทำให้กระโดดคุณภาพในด้านการวิจัย วิธีนี้จะใช้กันอย่างแพร่หลายในชีวเคมีด้านเนื้องอกวิทยาสัณฐานวิทยาภูมิคุ้มกันวิทยาพันธุศาสตร์และสาขาอื่น ๆ การเพิ่มประสิทธิภาพอย่างมีนัยสำคัญของความละเอียดที่ให้ไว้โดยอุปกรณ์การไหลของความจุของอิเล็กตรอนซึ่งผ่านสนามแม่เหล็กไฟฟ้าสูญญากาศ หลังหันสร้างเลนส์พิเศษ อิเล็กตรอนสามารถที่จะผ่านโครงสร้างของวัตถุหรือสะท้อนจากพวกเขาด้วยการเบี่ยงเบนจากมุมที่แตกต่างกัน ผลที่ตามมาจะปรากฏขึ้นบนหน้าจอเรืองแสงของอุปกรณ์ ถ้ามุมมองภาพถ่ายกล้องจุลทรรศน์ได้รับเมื่อสแกนตามลำดับเซอร์ราวด์

ข้อกำหนดเบื้องต้น

มันเป็นที่น่าสังเกตว่าก่อนที่จะผ่านการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กทรอนิกส์วัตถุที่อยู่ภายใต้การฝึกอบรมพิเศษ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการใช้งานของการตรึงทางกายภาพหรือทางเคมีของเนื้อเยื่อและสิ่งมีชีวิต วัสดุตัดชิ้นเนื้อและในนอกจากนี้ dewatered ถูกฝังอยู่ในอีพอกซีเรซินตัดแก้วหรือเพชรมีดในส่วนที่บางเฉียบ แล้วความคมชัดและการศึกษาของพวกเขา สแกนกล้องจุลทรรศน์ตรวจสอบพื้นผิวของวัตถุ การทำเช่นนี้พวกเขาพ่นสารพิเศษในห้องสูญญากาศ